生物化學實驗

第一篇 基本技能訓練
第一章 實驗室規(guī)則
一、學生實驗守則
二、實驗室安全防護知識
三、實驗室滅火法
第二章 玻璃儀器的洗滌
一、生物化學實驗常用玻璃儀器
二、實驗室常用的洗滌溶液
三、常用玻璃儀器的洗滌
四、玻璃器皿的干燥
第三章 常用容量器的正確使用
一、吸管
二、微量移液器
三、容量瓶
四、滴定管
五、量筒
第四章 試劑的配制
一、溶液濃度的表示及配制
二、溶液濃度的調整
三、試劑配制中的注意事項
第五章 制備生命大分子物質的基本操作
一、實驗材料的選擇和處理
二、細胞的破碎
三、有效成分的提取
四、振蕩與攪拌
五、離心
六、沉淀的過濾與洗滌
七、生命大分子物質的濃縮
八、生命大分子物質的冷凍干燥
第六章 實驗誤差和數(shù)據(jù)處理
一、實驗誤差
二、數(shù)據(jù)處理
第七章 實驗記錄、實驗報告及考評方式
一、實驗記錄
二、實驗報告
三、考核方式與評分方法
第二篇 生物化學實驗
第八章 糖
實驗一 硅膠G薄層層析法分離鑒定糖類
實驗二 植物水溶性總糖的提取和含量測定（蒽酮比色法）
實驗三 3，5-二硝基水楊酸比色定糖法
實驗四 旋光法測定淀粉含量
第九章 脂
實驗五 脂肪碘值的測定
實驗六 磷硫鐵法測定血清總膽固醇含量
實驗七 粗脂肪的提取及含量的測定
實驗八 蛋黃中卵磷脂的提取、純化與鑒定
實驗九 卵磷脂的制備及氣相色譜分析
第十章 氨基酸
實驗十 甲醛滴定法測定氨基氮
實驗十一 紙層析法分離鑒定氨基酸
實驗十二 茶葉中茶多酚及氨基酸的提取和定量測定
第十一章 蛋白質
實驗十三 蛋白質兩性性質與等電點的測定
實驗十四 蛋白質的沉淀、變性反應
實驗十五 蛋白質含量的測定(雙縮脲法）
實驗十六 蛋白質含量的測定(Folin-酚法）
實驗十七 蛋白質含量的測定(考馬斯亮藍法）
實驗十八 牛乳中酪蛋白的提取及含量測定
實驗十九 蛋白質含量的測定(微量凱氏定氮法）
實驗二十 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
實驗二十一 蛋白質的透析技術
實驗二十二 蛋白質的分級鹽析及凝膠過濾法脫鹽
實驗二十三 大豆蛋白的提取、含量測定及氨基酸組成分析
實驗二十四 雞卵類黏蛋白的分離與純化
實驗二十五 SDS-PAGE測定蛋白質相對分子質量
實驗二十六 凝膠過濾層析法測定蛋白質相對分子質量
第十二章 核酸
實驗二十七 動物肝臟DNA的提取
實驗二十八 二苯胺定糖法測定DNA含量
實驗二十九 定磷法測定RNA含量
實驗三十 離子交換柱層析法分離核苷酸
第十三章 酶
實驗三十一 酶的特異性
實驗三十二 酶促反應動力學(pH、溫度、激活劑和抑制劑對酶促反應速度的影響）
實驗三十三 瓊脂糖凝膠電泳分離乳酸脫氫酶同工酶
實驗三十四 親和層析法純化胰蛋白酶
第十四章 維生素
實驗三十五 熒光分光光度法測定維生素B2的含量
實驗三十六 2，6-二氯酚靛酚法測定維生素C含量
第十五章 新陳代謝
實驗三十七 血液中葡萄糖的測定——鄰甲苯胺法
實驗三十八 肝糖原的提取、鑒定及定量測定
實驗三十九 糖酵解中間產(chǎn)物的測定
實驗四十 肌糖原的酵解作用
實驗四十一 薄層層析法鑒定轉氨酶的轉氨基作用
實驗四十二 細胞色素C的制備及測定
實驗四十三 高效液相色譜法測定雌激素含量
附錄
一、生物化學實驗常用儀器的使用方法
(一）分光光度計
(二）離心機
(三）電泳儀
(四）PCR儀
(五）凝膠成像及分析系統(tǒng)
(六）恒溫水浴鍋
(七）酸度計
(八）恒溫振蕩培養(yǎng)箱
(九）旋轉蒸發(fā)儀
(十）高效液相色譜儀
(十一）核酸蛋白檢測分析系統(tǒng)
(十二）超凈工作臺
(十三）高壓蒸汽滅菌鍋
二、常用緩沖溶液的配制
(一）甘氨酸-鹽酸緩沖液(0．05mol／L pH2．2～3．6，25℃）
(二）氯化鉀-鹽酸緩沖液(0．05mol／L，pH1．0～2．2，25℃）
(三）鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸緩沖液(0．05 mol／L，pH2．2～4．0，20℃）
(四）醋酸-醋酸鈉緩沖液(0．2mol／L，pH3．6～5．8，18℃）
(五）鄰苯二甲酸氫鉀一氫氧化鈉緩沖液(pH4．1～5．9，25 ℃）
(六）檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(0．1mol／L，pH3．0～6．2）
(七）磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(0．05 mol／L，pH5．8～8．0）
(八）磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液(pH2．6～7．6）
(九）磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(0．2 mol／L，25℃）
(十）巴比妥鈉-鹽酸緩沖液(pH6．8～9．6，18℃）
(十一）Tris-鹽酸緩沖液(O．05mol／L pH7～9，25℃）
(十二）硼酸-硼砂緩沖液(pH7．．～9．0）
(十三）碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液(0．1 mol／L，pH9．2～10．8）
(十四）甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液(0．05 mol／L，pH8．6～10．6，25℃）
(十五）硼砂緩沖液(pH8．1～10．7，25℃）
(十六）酸度計常用標準緩沖溶液的配制
三、層析法常用數(shù)據(jù)表
(一）凝膠過濾用相對分子質量標準品
(二）瓊脂糖凝膠技術數(shù)據(jù)
(三）Sephadex G型交聯(lián)葡聚糖凝膠的數(shù)據(jù)
(四）Sephadex G型交聯(lián)葡聚糖凝膠溶脹所需時間
(五）聚丙烯酰胺凝膠技術數(shù)據(jù)
(六）離子交換層析介質的技術數(shù)據(jù)
(七）薄層層析分離各類物質常用的展層溶劑
四、硫酸銨飽和度常用表
(一）不同溫度下飽和硫酸銨溶液的數(shù)據(jù)
(二）調整硫酸銨溶液飽和度計算表(0℃）
(三）調整硫酸銨溶液飽和度計算表(25℃）