生物工程技術實驗指導

第一篇 常用生物工程實驗技術及原理
第一章 外源基因在哺乳動物中的表達與檢測
第二章 基因突變和蛋白質(zhì)工程
第三章 色譜（層析）技術
第四章 蛋白電泳技術
第五章 生物大分子的分離純化及鑒定
第六章 蛋白質(zhì)的免疫檢測技術
第七章 酶工程概述及酶的固定化
第八章 單克隆抗體制備技術
第九章 轉(zhuǎn)基因動物技術
第十章 植物細胞工程的基本原理和方法
第十一章 微生物發(fā)酵與發(fā)酵工程
第十二章 基因工程制藥技術與原理
參考書目
第二篇 學生實驗
基因工程和蛋白質(zhì)工程
實驗一 J3一半乳糖苷酶基因（faz）的定點突變
實驗二 B一半乳糖苷酶基因（zacz）的定點突變片段的克隆
實驗三 J3一半乳糖苷酶基因（zacz）在大腸桿菌中的表達及活性檢測
實驗四 B一半乳糖苷酶基因（zacz）在真核細胞McF一7中的表達
實驗五 野生型及點突變的MMLV反轉(zhuǎn)錄酶的活力和構象比較
實驗六 雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗七 蛋白質(zhì)的變性和復性
酶工程
實驗八 溶菌酶的提取和系列性質(zhì)測定
實驗九 植物細胞培養(yǎng)和次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)
實驗十 B一半乳糖苷酶的固定化及應用
實驗十一 親和層析法分離植物鈣調(diào)素結合蛋白
實驗十二 蛋白質(zhì)的N端氨基酸測定
細胞工程
實驗十三 小鼠單克隆抗體的制備
實驗十四 綠色熒光蛋白基因在哺乳動物細胞中的表達與檢測
實驗十五 顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠
實驗十六 煙草葉片愈傷組織誘導和器官發(fā)生
實驗十七 煙草原生質(zhì)體分離和體細胞雜交
實驗十八 農(nóng)桿菌與煙草葉片的共培養(yǎng)和轉(zhuǎn)基因細胞的篩選與鑒定
發(fā)酵工程
實驗十九 固體發(fā)酵法生產(chǎn)檸檬酸
實驗二十 液體發(fā)酵法生產(chǎn)鏈霉素
實驗二十一 基因工程藥物制備技術
附錄
附錄一 生物工程技術常用緩沖液、培養(yǎng)基及重要試劑的配制
一、常用緩沖液的配制
二、常用基因工程緩；中液
三、常用電泳緩沖液
四、常用凝膠加樣緩沖液
五、常用限制性內(nèi)切酶酶切位點及緩沖液
六、基因工程常用貯存液
七、常用培養(yǎng)基
八、常用植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基
九、常用抗生素溶液
附錄二 生物工程技術相關實驗資料和常用數(shù)據(jù)
一、常用單位及換算方法
二、常用核酸、蛋白質(zhì)換算數(shù)據(jù)
三、線性DNA的長度（kd）與其相對分子質(zhì)量的關系
四、氨基酸符號及相應密碼子
五、常見市售酸堿的濃度
六、各種濃度酸堿貯存液的近似pH值
七、硫酸銨飽和度的常用表
八、某些生物大分子、亞細胞器及微生物的沉降系數(shù)
九、幾種主要同位素的衰變及半衰期
十、離心機轉(zhuǎn)速與相對離心力的換算和列線圖
十一、層析法用于生物工程的常用數(shù)據(jù)
十二、細胞培養(yǎng)中可能出現(xiàn)的問題、原因及解決方法
十三、菌種保存