醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)

第一章 染色體和基因
第一節(jié) 基因的概念
一、基因的生物學(xué)定義
二、基因的分子生物學(xué)定義
三、細(xì)胞基因組
第二節(jié) 原核生物與真核生物
一、生物種類
二、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞內(nèi)核酸含量、種類和功能的差異
第三節(jié) 病毒基因組
第四節(jié) 細(xì)菌基因組
一、細(xì)菌染色體基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
二、大腸桿菌
三、質(zhì)粒
第五節(jié) 真核生物基因及特點(diǎn)
一、真核生物基因組的一般特點(diǎn)
二、真核生物基因組的C值矛盾
三、真核生物DNA序列的類型
四、多基因家族
五、DNA指紋技術(shù)
第六節(jié) 染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)
一、染色質(zhì)的主要成分
二、核小體是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位
第七節(jié) 染色體形態(tài)、功能研究中所用術(shù)語與新技術(shù)簡介
小結(jié)
第二章 細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡
第一節(jié) 細(xì)胞周期
一、細(xì)胞周期
二、細(xì)胞周期的控制點(diǎn)
第二節(jié) 細(xì)胞周期的調(diào)控
一、細(xì)胞因子與相應(yīng)的受體
二、周期素與周期素依賴性激酶對(duì)細(xì)胞周期的調(diào)控
三、參與細(xì)胞周期調(diào)控的原癌基因及抑癌基因
四、cAMP與cGMP在細(xì)胞周期中的變化
第三節(jié) 細(xì)胞凋亡
一、細(xì)胞凋亡
二、細(xì)胞凋亡的基因調(diào)控
小結(jié)
第三章 重組DNA技術(shù)概述
第一節(jié) 分子生物學(xué)簡史及重組DNA技術(shù)的誕生
一、重組DNA技術(shù)誕生的理論基礎(chǔ)
二、關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)技術(shù)問世為重組DNA技術(shù)奠基
第二節(jié) 重組DNA技術(shù)的定義及步驟
一、重組DNA技術(shù)定義
二、重組DNA技術(shù)的重大意義
三、重組DNA技術(shù)的基本步驟
第三節(jié) 重要的工具酶
一、限制性核酸內(nèi)切酶
二、DNA聚合酶
三、DNA連接酶
四、T4多核苷酸激酶
五、堿性磷酸酶
小結(jié)
第四章 獲得目的基因
第一節(jié) 獲得目的基因的原理方法
一、構(gòu)建cDNA文庫篩選目的基因
二、構(gòu)建真核細(xì)胞基因組文庫篩選目的基因
三、人工合成目的基因DNA片段
四、聚合酶鏈反應(yīng)合成DNA
五、其他方法
第二節(jié) 獲得目的基因方法的選擇原則
一、根據(jù)獲得目的基因的目的選擇方法
二、根據(jù)目的基因本身特點(diǎn)選擇方法
三、根據(jù)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備條件選擇方法
第三節(jié) 目的基因序列測定
一、目的基因序列測定的意義
二、目的基因測序方法
三、長鏈DNA測序的策略
小結(jié)
第五章 重組體的構(gòu)成、導(dǎo)入和篩選
第一節(jié) 基因克隆的載體
一、質(zhì)粒載體
二、噬菌體載體
第二節(jié) 目的基因與載體的連接
一、連接的策略
二、連接反應(yīng)的建立
第三節(jié) 重組子導(dǎo)入受體菌
一、氯化鈣法
二、電穿孔法
第四節(jié) 重組子的篩選與鑒定
一、插入片段長度鑒定
二、插入片段方向性鑒定
小結(jié)
第六章 重組體在宿主細(xì)胞中表達(dá)與調(diào)控
第一節(jié) 基因表達(dá)概述
一、基因表達(dá)的概念
二、基因表達(dá)的基本條件
第二節(jié) 重組體在原核細(xì)胞中的表達(dá)
一、原核生物基因表達(dá)的特點(diǎn)
二、外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的重要調(diào)控元件
三、原核細(xì)胞表達(dá)載體簡介
四、對(duì)外源目的基因的要求
第三節(jié) 重組體在真核細(xì)胞中表達(dá)的策略
一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)及載體種類
二、真核細(xì)胞表達(dá)元件
三、哺乳動(dòng)物基因轉(zhuǎn)移的遺傳選擇性標(biāo)記
四、表位標(biāo)記
五、基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測——Western印跡法
第四節(jié) 表達(dá)產(chǎn)物的分離與純化
一、包涵體中重組蛋白質(zhì)的分離與純化
二、蛋白質(zhì)純化技術(shù)
小結(jié)
第七章 核酸的雜交
第一節(jié) 核酸雜交的基本原理
一、核酸變性
二、核酸的復(fù)性
三、核酸雜交概念
第二節(jié) 核酸探針
一、探針的概念
二、探針種類和選擇
三、探針標(biāo)記原理
第三節(jié) 核酸分子雜交技術(shù)
一、液相分子雜交
二、固相分子雜交
小結(jié)
第八章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
第一節(jié) PCR基本原理和影響因素
一、基本原理
二、參與PCR反應(yīng)體系的因素及其作用
第二節(jié) 常用的幾種PCR反應(yīng)
一、反轉(zhuǎn)錄PCR
二、定量PCR
三、堿基替代PCR
四、彩色PCR
五、重組PCR
六、不對(duì)稱PCR
七、膜結(jié)合PCR
八、固著PCR
九、原位PCR
十、反向PCR
第三節(jié) PCR在分子生物學(xué)中的應(yīng)用
一、用PCR制備cDNA文庫與篩選
二、PCR直接測序法
三、PCR用于染色體區(qū)帶特異片段克隆
四、檢測突變堿基
五、用簡并引物法擴(kuò)增未知序列
六、用PCR標(biāo)記DNA探針
七、PCR與新基因的尋找
第四節(jié) PCR在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
一、病原體檢查
二、遺傳病的基因診斷
三、腫瘤的診斷、轉(zhuǎn)移確定
四、PCR用于組織器官移植的配型選擇
小結(jié)
第九章 分子免疫學(xué)
第一節(jié) 免疫球蛋白
一、免疫球蛋白分子基本結(jié)構(gòu)
二、免疫球蛋白基因的染色體定位
三、免疫球蛋白基因結(jié)構(gòu)的重排
四、抗體多樣性的形成
第二節(jié) T細(xì)胞抗原受體
一、T細(xì)胞抗原受體結(jié)構(gòu)
二、T細(xì)胞抗原受體基因結(jié)構(gòu)和重排
第三節(jié) 主要組織相容性復(fù)合體
一、MHC分子結(jié)構(gòu)
二、MHC基因結(jié)構(gòu)
三、MHC基因的生物學(xué)功能
四、MHC分子參與對(duì)抗原的處理和識(shí)別
第四節(jié) 細(xì)胞因子
一、細(xì)胞因子的共同特征
二、細(xì)胞因子的功能
三、細(xì)胞因子及其受體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
四、細(xì)胞因子基因
小結(jié)
第十章 神經(jīng)營養(yǎng)因子
第一節(jié) 神經(jīng)營養(yǎng)因子總論
一、神經(jīng)營養(yǎng)因子的種類
二、細(xì)胞因子的功能特點(diǎn)
第二節(jié) 神經(jīng)生長因子各論
一、神經(jīng)營養(yǎng)因子
二、白細(xì)胞介素6
第三節(jié) 神經(jīng)營養(yǎng)因子與疾病
一、細(xì)胞因子與神經(jīng)再生
二、神經(jīng)營養(yǎng)因子與受體
三、老年性癡呆
小結(jié)
第十一章 癌基因和腫瘤抑制基因
第一節(jié) 腫瘤細(xì)胞的特征
一、腫瘤是一種基因的疾病
二、腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中的特征
第二節(jié) 腫瘤病毒和癌基因
一、DNA腫瘤病毒和癌基因
二、反轉(zhuǎn)錄病毒和癌基因
第三節(jié) 腫瘤抑制基因
一、腫瘤抑制基因存在的證據(jù)
二、RB基因——控制細(xì)胞周期的腫瘤抑制基因
三、p53基因——“基因組的保護(hù)神”
第四節(jié) 腫瘤形成的多步驟學(xué)說
一、多步驟學(xué)說的實(shí)驗(yàn)證據(jù)
二、人類直腸癌和多步驟致癌說
小結(jié)
第十二章 基因診斷和基因治療
第一節(jié) 基因診斷
一、基因診斷的定義、原理
二、基因診斷的途徑
三、基因診斷的技術(shù)和方法
四、分子探針
五、基因診斷在感染性疾病、遺傳病和腫瘤中的應(yīng)用
第二節(jié) 基因治療的基本概念和策略
一、基因治療的概念
二、基因治療的策略
第三節(jié) 基因治療的條件
一、目的基因的獲得
二、靶細(xì)胞的選擇
三、基因轉(zhuǎn)移的方法
小結(jié)
第十三章 DNA重組技術(shù)在醫(yī)學(xué)和制藥工業(yè)中的應(yīng)用
第一節(jié) DNA重組技術(shù)的應(yīng)用
一、重組蛋白質(zhì)的表達(dá)系統(tǒng)
二、利用細(xì)菌作為表達(dá)系統(tǒng)
三、利用酵母細(xì)胞作為表達(dá)系統(tǒng)
四、利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞作為表達(dá)系統(tǒng)
第二節(jié) 蛋白質(zhì)工程
一、抗體工程
二、蛋白質(zhì)工程的其他應(yīng)用
三、噬菌體展示法
第三節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和“動(dòng)物藥廠”
一、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物
二、“動(dòng)物藥廠”
三、抗感染動(dòng)物
第四節(jié) 動(dòng)物克隆
小結(jié)